以恒温恒湿培养箱为基础的酒精发酵实验
2025-04-08 09:45 0次
以下是以恒温恒湿培养箱为基础的酒精发酵实验步骤：
实验材料与设备
材料：酵母（如酿酒酵母）、葡萄糖、蒸馏水、无水乙醇、硫酸、氢氧化钠、石灰水、重铬酸钾、浓硫酸、酚酞、甲基红、溴甲酚绿等试剂。
设备：恒温恒湿培养箱、锥形瓶、发酵管、移液管、量筒、天平、pH计、离心机、分光光度计、蒸馏装置等。
实验步骤
1. 培养基的配制
称取一定量的葡萄糖，溶解于蒸馏水中，配制成一定浓度的葡萄糖溶液，如10% - 20%的葡萄糖溶液。将溶液转移至锥形瓶中，用天平称取适量的酵母，加入到葡萄糖溶液中，轻轻搅拌均匀，使酵母充分溶解。
2. 实验装置的组装
将含有酵母和葡萄糖溶液的锥形瓶密封好，连接上发酵管。发酵管的一端插入锥形瓶中，另一端放入装有石灰水的容器中，用于检测发酵过程中产生的二氧化碳。
3. 放入恒温恒湿培养箱：
将组装好的实验装置放入恒温恒湿培养箱中，设置温度为30℃ - 35℃，湿度为70% - 80%。这是酵母进行酒精发酵的适宜温度和湿度范围。
4. 发酵过程的监测
二氧化碳的检：观察石灰水的变化，若石灰水变浑浊，说明发酵过程中有二氧化碳产生。
酒精含量的测定：定期从锥形瓶中取出少量发酵液，采用蒸馏法将酒精分离出来，然后用重铬酸钾法或气相色谱法测定酒精的含量。重铬酸钾法的原理是，在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应，溶液颜色由橙色变为绿色，通过比色法可以测定酒精的含量。
pH值的测定：用pH计定期测定发酵液的pH值，记录其变化。在发酵过程中，由于酵母代谢产生酸性物质，pH值会逐渐下降。
酵母细胞数的测定：采用血球计数板在显微镜下计数酵母细胞的数量，观察酵母细胞的生长情况。
5. 实验结束与数据处理
当发酵液中的酒精含量不再增加，或者达到预期的发酵时间后，结束实验。整理实验数据，包括不同时间点的酒精含量、pH值、酵母细胞数等，分析这些数据，绘制酒精发酵曲线，以时间为横坐标，酒精含量为纵坐标，直观地展示酒精发酵的过程。
注意事项
实验过程中要保持实验装置的密封性，防止外界空气进入锥形瓶，影响发酵过程。
每次取发酵液进行检测后，要及时将锥形瓶密封好，避免发酵液被污染。
恒温恒湿培养箱的温度和湿度要准确控制，避免温度过高或过低、湿度过大或过小对发酵产生不利影响。
在使用化学试剂时，要注意安全，如浓硫酸具有腐蚀性，重铬酸钾具有毒性，要严格按照操作规程进行操作。
(责任编辑：luohe)
