在水生生态系统和碳中和研究领域，藻类的光合作用是物质循环与能量流动的核心环节。其光合效率不仅受自身生理特性调控，还与光照强度、温度、湿度等环境因子密切相关。恒温恒湿培养箱凭借对多参数的精准控制，为解析复杂环境组合对藻类光合生理的影响提供了理想平台。本文以常见淡水绿藻小球藻（Chlorella vulgaris）为研究对象，系统探究不同光温湿度组合下其光合作用的响应规律，为藻类资源开发及生态模型构建提供实验依据。
       实验选用小球藻FACHB-418株系，采用BG11培养基，接种于250mL三角瓶，初始细胞密度调至1×10⁶cells/mL。实验设备采用配备可编程光源的恒温恒湿培养箱，光照强度设置3000lx、6000lx、9000lx三个梯度，温度设置20℃、25℃、30℃三个梯度，湿度设置60%、75%、90%三个梯度，形成27组组合处理，每组3次重复，培养周期为72h。
       光合作用指标测定包括：采用便携式叶绿素荧光仪测定PSⅡ最大光化学效率（Fv/Fm）和实际光化学效率（ΦPSⅡ）；通过氧电极法测定净光合速率（Pn）；分光光度法测定叶绿素a含量（提取液为90%丙酮，测定663nm和645nm吸光度）。每日固定时间取样，同步记录细胞密度（血球计数板法）。
       实验结果显示，光温湿度组合对小球藻光合作用呈现显著交互效应。在光照6000lx、温度25℃、湿度75%的组合下，Fv/Fm达到0.79±0.02，ΦPSⅡ为0.68±0.03，均显著高于其他处理组（P<0.05）。净光合速率在此条件下达到峰值（12.6±0.8μmol O₂・mg⁻¹Chl・h⁻¹），是3000lx、20℃、60%组合的2.3倍。
       光照强度的影响表现为低光限制与高光抑制双重效应：3000lx时各项光合指标随光照增强而上升，9000lx时则出现下降，且叶绿素a含量降低18.7%±2.1%，提示强光导致光氧化损伤。温度方面，25℃组的光合效率显著高于20℃和30℃组，30℃时Fv/Fm下降至0.62±0.03，可能与酶活性受抑制有关。
       湿度的作用呈现间接调控特征：75%湿度组的细胞密度（8.3×10⁶cells/mL）显著高于60%组（6.1×10⁶cells/mL）和90%组（5.7×10⁶cells/mL）。低湿度（60%）导致培养基蒸发量增加，盐度升高抑制生长；高湿度（90%）则可能降低CO₂扩散速率，限制碳同化过程，使胞间CO₂浓度下降15.3%±1.8%。
       相关性分析表明，净光合速率与Fv/Fm（r=0.89）、叶绿素a含量（r=0.76）呈显著正相关，与胞间CO₂浓度（r=0.68）的相关性在高湿度组更为突出。这提示光系统Ⅱ活性与碳代谢的协同作用是影响光合效率的关键。
       本研究揭示6000lx、25℃、75%湿度是小球藻光合作用的最优组合，此条件下光反应与暗反应达到动态平衡。与陆生植物不同，藻类对湿度的响应更多通过介质渗透压间接体现，这为藻类培养装置的湿度参数优化提供了新思路。实验局限性在于未模拟自然光照的昼夜节律，后续可结合转录组学分析rbcL基因（编码Rubisco酶）的表达差异，深入阐释分子调控机制。
       结论表明，恒温恒湿培养箱的多参数协同调控为研究藻类光合生理提供了精准工具。小球藻光合作用对光温湿度组合的响应存在显著阈值效应，6000lx、25℃、75%是兼顾光能利用与碳固定的最佳条件。该发现为微藻大规模培养的环境调控（如光伏-藻类共生系统的光照设计）提供了量化依据，对提升生物固碳效率具有实践意义。