二氧化碳培养箱水盘污染控制和加湿问题

2017-07-24 12:43 0

        二氧化碳培养箱是开展免疫学、肿瘤学、遗传学及生物工程所必须的关键设备,广泛应用于细胞、组织培养和某些特殊微生物的培养,常见于细胞动力学研究、哺乳动物细胞分泌物的收集、各种物理、化学因素的致癌或毒理效应、抗原的研究和生产、培养杂交瘤细胞生产抗体、体外授精(IVF)、干细胞、组织工程、药物筛选等研究领域。
        细胞培养所需的条件:37度的温度;5%二氧化碳浓度;环境湿度大于95%;温度可以通过PID精确控制;二氧化碳浓度可以通过红外传感器进行精确控制,该怎样控制湿度呢?
  二氧化碳培养箱内通常采用两种方式控制箱体内湿度。一是采用被动控湿法,即通常的二氧化碳培养箱内均放置一个3L的水盘,内盛3L无菌纯水,37度的温度,水自然蒸发,使箱体内湿度达到95%。二是一些高级的二氧化碳培养箱,采用主动加湿系统(蒸汽发生器,加热水盘,喷雾器等),可以 控制箱体内的湿度,如低温培养时(低温二氧化碳培养箱)就需要主动加湿的方法。
  水盘污染控制问题:这种高湿度条件下,放置在箱体内部的水盘中的纯净水,很容易造成微生物的滋生,产生污染,导致细胞培养完全失败。
  目前,控制水盘内污染的方法有如下几种:
  1、定期(至少每两周一次),更换水盘内的无菌蒸馏水或无菌去离子水。
  2、在水盘内添加适量硫酸铜,配制方法:20g无水硫酸铜+5ml浓硫酸+1L灭菌纯水。
  3、夏季气温高时,水盘里加0.02%的叠氮钠可以有效的预防真菌污染。
  4、水盘内添加适量抗生素。
  5、定期为培养箱(含水盘)进行一次高温灭菌。
  6、使用专用的水盘污染控制试剂,如市面上有些CO2培养箱厂家提供水盘污染控制专用的银离子消毒盒,说明书上描述能有效杀灭600中微生物,能持续使用6个月,但此类专用污染控制试剂较常规方法,存在价格较昂贵缺点。采用主动加湿的方式就不存在污染问题。
(责任编辑:admin)

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