霉菌的培养和观察

2018-09-12 09:24 0

    喆图小编今天来说说霉菌的培养和观察的详情摘要:通过在一定固定环境下培育,根霉,毛霉,黑曲霉,青霉四种霉菌,先通过菌种的外形对其有一个“宏观”的认识,然后再在显微镜低倍或高倍镜下分别观察四种菌的形态,孢子囊及孢子形态,菌丝形态等方面。发现根霉,黑曲霉和青霉菌丝均有横隔;青霉的分生孢子小梗呈扫帚状等现象。
接下来就说说实验材料及步骤
(一) 实验材料 
根霉,毛霉,黑曲霉,青霉,土豆琼脂培养基,培养皿,载玻片,盖玻片,镊子,显微镜,小刀,U形管等。 
(二) 实验步骤  
1、配置培养基:根据原料用量配置土豆培养基。配置时,先急火煮沸,在温火加热20min,若有浑浊出现,则需过滤,然后定容。包扎土豆培养基,甘油等其他用品。灭菌后取出备用2、培养小室准备及灭菌 在培养皿底部铺一张略小于皿底的圆形滤纸片,滤纸片上依次放上“U”形载玻片搁架、载玻片、盖玻片-四片,盖上皿盖,牛皮纸包扎,于恒温干燥箱中121℃灭菌30min烘干备用;
 2、琼脂薄片制作:
a) 将稍微冷却的培养基,倒在培养皿 中,做成薄平板。培养基应该要倒 得薄而均匀。注意无菌操作。
b) 用解剖刀将琼脂薄平板切成边长不大于1cm的琼脂薄片
c) 用解剖刀将琼脂薄片移至小室载玻片上(一个载玻片上方两块薄片)
3、取菌接种:用接种环挑取少量待观察的霉菌孢子(霉菌菌种的表面轻轻刮取即可),接种于固体培养基边缘,以便于霉菌生长。接种时只要将带菌的接种环在载玻片上轻轻碰几下即可。接种量要少,以免培养后菌丝过于稠密而影响观察。
4、加盖玻片:用无菌镊子将皿内的盖玻片盖在琼脂薄层上,用镊子轻压盖玻片,使盖玻片和载玻片之间的距离相当接近,但不能压扁。盖玻片不能紧贴载玻片,要彼此留有小缝隙,一是为了通气,二是使各部分结构平行排列,易于观察。
5、倒保湿剂:每皿倒入约2-3mL 20%的经灭菌处理的甘油,使皿内滤纸完全湿润,以保持皿内湿度,盖上皿盖。制成载玻片湿室。
6、正置培养:将平皿置于27℃霉菌培养箱中培养一周。
7、观察: 将培养好的载玻片取出,置于显微镜下直接观察。 
(三)实验结果及分析 
实验结果 
1.根霉:菌丝无隔,有假根、匍匐菌丝。假根着生处有向上直立的孢囊梗,其顶端膨大成孢子囊,底部为半球形囊轴。
2.毛霉:孢囊梗直接由菌丝出,顶端为球形孢子囊 
3.黑曲霉:菌丝有隔,气生菌丝分化为分生孢子梗(无隔),顶端 膨胀为球状顶囊。
4.青霉:菌丝有隔,分生孢子梗顶端不膨大,无顶囊,多次分枝成几轮小梗,小梗顶端长孢子。分生孢子梗呈扫帚状。
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