化妆品中氨基酸含量的测定步骤

2019-05-15 14:15 0

    随着大家的生活水平提高,平时使用的化妆品种类也是多如牛毛,其实化妆品的好坏跟其氨基酸的含量是有关系的。下面给大家介绍一下具体的测定步骤。
1、原理
蛋白质物质经水解成氨基酸,而氨基酸在一定的PH条件下,与茚三酮反应生成蓝紫色化合物,对其进行比色定量测定,从而计算出相应的氨基酸含量。
2、测定步骤
2.1标准曲线的绘制
    准确移取氨基酸标准溶液0.0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0mL(相当于氨基酸0,40,80,120,160,200pg)分别置于25mL刻度试管中,加水补充至4mL,然后各加入2%茚三酮溶液和磷酸盐缓冲溶液各1mL,摇匀。置水浴锅中加热15min, 取出冷却至室温, 加水至刻度, 摇匀。静置15min, 用分光光度计在570nm波长下以水作参比,用1cm比色皿测定试液的吸光度,绘制吸光度对氨基酸含量(pg)的标准曲线。
2.2样品前处理
    准确称取样品约5g(准确至0.001g) 于试管, 加人6mol/L盐酸溶液约10mL~20mL于沸水浴中水解约6h(对乳化体可先将试样置于水浴锅中破乳1h~2h) 。加人约1g~2g蜡块约30min后, 取出试管冷却。去除蜡块,将溶液移至100mL烧杯中,在酸度计上用碱液调节pH至7.5~8.0,再将溶液移人100mL容量瓶中并加水稀释至刻度,摇匀待用。
2.3测定
    移取试液1mL~4mL置于25mL刻度试管中,以下按2.1测定步骤进行。测得吸光度,通过标准曲线计算氨基酸的含量,同时做一空白样。
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